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m Identificar el proceso en el que el nitrógeno molecular se convierte en

compuesto de nitrógeno-oxigeno.
m La forma en la que se fija el nitrógeno.
m Que le sucede al nitrógeno después de haberse fijado.
m Identificar que bacterias participan en la fijación biológica de nitrógeno.


 

 


Los inoculantes fijadores de nitrógeno son elaborados para mejorar el rendimiento

de los cultivos a través de un buen suministro de nutrientes al en el medio
ambiente, de esta manera se mantiene el desarrollo de la agricultura además de
que; el uso de fertilizantes es una manera viable ya que muchas bacterias se
encuentran de forma natural en el suelo, establecen asociaciones simbióticas con
diferentes cultivos y estas son las encargadas de fijar más eficazmente el
nitrógeno.

Así mismo son elaborados ya que se forma una interacción bacteria-planta en

donde se forma un sistema simbiótico en donde la planta aporta carbono y la
bacteria aporta nutrientes como nitrógeno y de forma indirecta el fósforo

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Los inoculantes son productos que contienen  
     de la atmósfera con una gran efectividad a través de una
asociación simbiótica con especies leguminosas principalmente, especies como
maíz, trigo, tabaco, arroz, pasturas en forma de compuestos fácilmente asimilables
(NH4).
Esto es !con bacterias, ya sea en forma directa sobre el suelo o aplicadas
sobre la semilla antes de la siembra, y el proceso de transformación enzimática se
denomina    y es uno de los componentes
críticos para la producción con altos rendimientos ya que además del agua, el
Nitrógeno suele ser una limitante en la producción. Dentro de los géneros más
conocidos de Bacterias Fijadoras de Nitrógeno, o promotores biológicos del
crecimiento vegetal, se encuentran los Rhizobium, Bradyrhizobium,
Mesorhizobium, Sinorhizobium, Mycorhizae, Cianobacterias, Pseudomonas,
Azospirillium, etc., que pueden ejercer su acción mediante un modelo simbiótico ó
no simbiótico con la especie vegetal. En las especies leguminosas, como, soja,
maní, alfalfa, poroto, etc., por sus características, se puede aprovechar este
modelo de simbiosis con bacterias para evitar la fertilización química, aprovechar
su rendimiento y eficacia, bajo costo, y tiene las ventajas adicionales de no
contaminar el ambiente. No obstante ello, para obtener el mayor beneficio, hay
que conocer el correcto manejo de los inoculantes ya que la efectividad dependerá
en mayor medida que la supervivencia de las bacterias adquiridas en el producto
comercial.

El Nitrógeno (N2), transformado en NH4 en los nódulos, pasará a las células no

infectadas donde se transformará fundamentalmente en Ureidos, y estos hacia los
tejidos. Tanto el Nitrógeno del suelo como la FBN, se complementan para
determinar los rendimientos máximos, y este complemento dependerá en gran
medida del Nitrógeno del suelo, ya que condicionará la fijación en cuanto la
cantidad de nódulos que se formen, y la actividad enzimática de los mismos. Esta
relación de fijación, será mayor cuanto más deficitarios estén los suelos en dicho
elemento mineral, lo cual está relacionado con el contenido de materia orgánica.
La capacidad de la planta para alimentar las bacterias también será un
condicionante de la fijación, y su capacidad para retirar permanentemente el
Nitrógeno de los nódulos evitando acumulación en los nódulos y su inhibición. Por
lo general, cada especie leguminosa es específica en cuanto a la cepa de
Bacterias con las que simbiotiza.
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     es el más conocido, la turba puede o no
estar estéril. El inoculante molido se mezcla y adhiere a la semilla.
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: en base a dolomita o vermiculita.
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formulados en base a turba aglomerada en gránulos. Permite aplicar
el inoculante dentro del surco de siembra junto con las semillas.
‡ 
En base oleosa (suelen tener fungicidas en la formulación) o acuosa.
Esta última es la tecnología mas avanzada. Se mezclan con la semilla o se aplican
en el surco junto con ella y se logra una adherencia mucho mayor que otras
formulaciones sólidas.

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‡ Estar, en la medida de lo posible, libre de contaminantes, para evitar relaciones
competitivas de supervivencia por sitio y sustrato en el recipiente que lo contiene.
‡ Aportar aproximadamente 106 bacterias vivas por cada semilla en el momento
de la inoculación para que a pesar de la alta tasa de muerte que generalmente
ocurre durante las primeras horas después de inoculada la semilla, sobreviva una
cantidad de bacterias suficiente como para colonizar las raíces.
‡ Proteger de la desecación a través del soporte ya que esta es la principal causa
de muerte del inóculo. La turba es el soporte ideal por su higroscopicidad y gran
superficie específica. El inconveniente de la turba es su dificultad para ser
esterilizada. En este sentido, los inoculantes líquidos acuosos son perfectamente
estériles y se conservan hasta un año en el envase a temperaturas próximas a los
4ºC pero son más susceptibles a desecación luego de aplicados (Ver la etiqueta
del producto).
‡ Según la Resolución Nº 310/94 del SENASA los inoculantes deben contener no
menos de 1.000 millones (109) de rizobios por g o ml de producto a la fecha de
elaboración y no menos de 100 millones (108) por g o ml a la fecha de
vencimiento.

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La inoculación debe realizarse mediante máquinas inoculadoras para lograr una
dosificación homogénea y un correcto mezclado sin dañar a las semillas. El
proceso de inoculación debe realizarse a la sombra y a temperaturas moderadas,
no superiores a 25ºC. No es recomendable mezclar inoculantes con agua
corriente con cloro o con alto contenido de arsénico.
 

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Para evitar fallas se recomienda al elegir el fungicida e insecticida seguir las

instrucciones del marbete y que transcurran no más de 6 horas desde la aplicación
conjunta de inoculante y fungicidas a la siembra.

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Deben mantenerse estables la temperatura y humedad.
Evitar la exposición al sol y el contacto con productos químicos que puedan
dañarlo.
A pesar de la gran cantidad de experiencias demostrativas de las ventajas de la
inoculación de cultivos, y el creciente mercado actual de inoculantes es necesario
realizar mucha investigación sobre aspectos tales como la selección de especies,
cepas y formulaciones que aumenten la estabilidad del inoculante y la
supervivencia de los microorganismos introducidos, como así también el aporte de
microelementos y moléculas orgánicas que acentúen el efecto promotor del
crecimiento que los caracteriza, para obtener mayores resultados que los
obtenidos hasta el momento.

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1. Qué tipo de leguminosa

2. Selección de sitio- Aislarlo de Rhizobium en etapa de envainada.
3. Muestreo- 5% de plantas en pie ³ plantas verdes sanas y de buen
crecimiento, envainado o llenado del grano- utilizar solo parte aérea´
4. Tratamiento de los nódulos
-lavado con agua destilada para eliminar tierra
-lavar con agua al 1% para eliminar materia organica
-lavar con detergente tipo dextrano
-enjuagar 6 o 7 veces con agua destilada
5. Preparación del medio ELMA-YMA solido y líquido
-fosfato di básico de potasio 0.5g
-sulfato de magnesio MgSO4 0.2g
-NaCl 0.1g
-manitol 10g
-extracto de levadura 1g
-agar 20g
6. Preparado en 100ml ajustar pH cajas petri en medio ELMA
7. Sembrar Rhizobium en cajas petri con medio ELMA, bajo campana de flujo
laminar exprimir con pinzas esteriles y se siembra en cuatros campos,
incubar a 30°C X 24hrs

8. Tinción de gram ± gram +

9. Reconocimiento bajo microscopio óptico de los Rhizobium de forma bacilar.

Desarrollo de inoculo ± preparar en medio ELMA liquido sin agar

Preparar un sustrato inerte que no interaccione con Rhizobium

10. Propagación
Matraces 250 ml + 100ml de medio ELMA liquido + 3 azadas de Rizobium y
agitación orbital a T° 20-30°C
Estabilización 36 hrs
Rencuentro de células variables de Rizobium

11. Inoculo recién preparado

12. Vida de almacén de 6 meses
13. Fase de estudio experimental

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Además de que los fijadores de nitrógeno son importantes para el rendimiento de

las plantas; también son importantes respecto a la simbiosis que existe entre las
plantas y las bacterias que se encuentran en los nódulos ya que son estas las que
aportan o ayudan a que el nitrógeno se encuentre en una forma disponible para
que la planta pueda absorberlo.
  
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