CALIDAD DE LA SEMILLA

En todo cultivo es imprescindible tener en cuenta la calidad de la semilla para el xito del mismo. La semilla es el material de partida para la produccin y es condicin indispensable que tenga una buena respuesta bajo las condiciones de siembra y que produzca una plntula vigorosa a los fines de alcanzar el mximo rendimiento. Desde un punto de vista sustentable, es imposible obtener una buena cosecha si no se parte de una semilla de calidad, ya que un cultivo puede resultar de una calidad inferior a la semilla sembrada, pero nunca mejor que ella. Si bien a travs de prcticas post cosecha, como el secado, acondicionamiento y

limpieza de semillas, es posible mejorar la calidad de la semilla cosechada, siempre es necesario evaluar la relacin costo beneficio. Las propiedades que deben reunir los lotes de semilla de calidad son: Genuidad: el lote de semillas deber responder a la especie y cultivar deseado. Pureza: estar libre de semillas extraas, de semillas de malezas u otros cultivares o especies. Limpieza: las semillas deben estar libres de materias extraas como palillos o tierra. Sanidad: estar libre de plagas y enfermedades. Viabilidad: las semillas deben ser capaces de germinar y desarrollar una plntula normal en condiciones ptimas de siembra. Vigor: las semillas deben germinar y desarrollar una plntula normal en situaciones de siembra desfavorables.

Viabilidad y pureza son los dos atributos que intervienen en las frmulas para determinar la densidad de siembra, por lo que su conocimineto es fundamental. El ensayo de germinacin o poder geminativo (PG) es el ms aceptado para evaluar la viabilidad de las semillas y el objetivo es determinar la potencialidad de las semillas para desarrollar plntulas normales y producir una implantacin rpida y pareja de los cultivos en condiciones ptimas. Sin embargo, los resultados de PG obtenidos en laboratorio frecuentemente no se correlacionan con los obtenidos a campo, porque no siempre se dan condiciones ptimas de siembra. Por esta razn, se ha elaborado un nuevo concepto que se ajusta mejor a la realidad y es el concepto de vigor, para lo cual se desarrollaron distintas pruebas de germinacin que simulan condiciones de siembra desfavorables como el estrs hdrico, la resistencia mecnica, pruebas de fro, entre otras. Estos anlisis se realizan en los laboratorios de semillas inscriptos en el "Registro Nacional de Laboratorios" para anlisis de semillas, y que otorgan certificados de calidad para la comercializacin de semillas. Adems, los servicios que brindan dichos laboratorios son de utilidad para los productores que desean corroborar la calidad de la "semilla de uso propio" (aquella guardada de una cosecha anterior) o adquirida en el comercio como certificada. De tal manera, que le permita calcular en forma precisa la densidad de siembra.

VIABILIDAD Y LONGEVIDAD DE LAS SEMILLAS

Una consideracin importante es la del lugar que ocupan las semillas en la conservacin de la biodiversidad y como fuente de material para el mejoramiento. Las semillas son repositoras de genes, por lo tanto, deben ser adecuadamente almacenadas y preservadas. Por otro lado, los mximos niveles de longevidad y calidad de las semillas dependern de la eficiencia con la cual se realice el almacenamiento. Una vez maduras, las semillas pierden humedad en la planta madre hasta valores que oscilan entre un 14 y 20%, momento en el que es posible su cosecha. De ser necesario, posteriormente, se procede a un secado natural o artificial de las mismas a contenidos de humedad de alrededor del 8% o inferiores, para su almacenamiento. Las semillas que

muestran este comportamiento y que pueden ser almacenadas durante largos perodos, son las denominadas ortodoxas. Como regla general, la longevidad de la semilla se duplica por cada 1% en que se reduce su porcentaje de humedad o cada 5C en que se disminuye la temperatura durante el almacenamiento. Adems, si las semillas se acondicionan en envases sellados con una humedad de 5-7% a -18C pueden mantener su viabilidad por un siglo. Son ejemplo de semillas ortodoxas la mayora de las especies cultivadas. Sin embargo, otro grupo de especies produce semillas que normalmente no se deshidratan en la planta madre y que mueren si su contenido de humedad se reduce por debajo de un valor crtico, son las denominadas semillas recalcitrantes. La longevidad de estas semillas es relativamente corta, desde unas pocas semanas a meses segn la especie. Son ejemplo la mayora de los cultivos tropicales, cacao (Theobroma cacao), caf (Coffea arabica), coco (Cocos nucifera), roble Europeo (Quercus robur), pino Paran (Araucaria angustifolia), mango (Mangifera indica). Las semillas recalcitrantes las producen dos tipos de plantas, las que crecen en ambientes acuticos, donde normalmente no es comn que las semillas se deshidraten y las plantas perennes que producen semillas a intervalos regulares que caen en ambientes relativamente hmedos. En estas ltimas la persistencia de la especie, depende principalmente del hbito perenne de la planta madre, ms que en el estado de vida latente de la unidad de dispersin. Por esta razn, el almacenamiento de este tipo de semillas constituye un desafo constante para los especialistas en conservacin de recursos genticos en bancos de germoplasma. Segn su longevidad, las semillas se pueden agrupar en tres categoras: microbiticas,que equivaldra a las recalcitrantes, mesobiticas aplicable a la mayora de las semillas ortodoxas, y las macrobiticas categora que incluye al grupo especial de semilla con cubiertas impermeables como en algunas leguminosas y malvceas capaces de controlar su propio contenido de humedad independientemente de la humedad externa.

DETERMINACIN DE LA CALIDAD DE LA SEMILLA

ANALISIS Y PRUEBAS DE LA GERMINACION

Materiales y Mtodos

Los ensayos se condujeron en el Laboratorio de la EEA Oliveros del INTA, Santa Fe Argentina. Se utiliz semilla comercial de soja del cv Don Mario 4870, que se sembr en el casete de germinacin (INTA Rizobacter) y se utilizaron 4 repeticiones de 50 semillas. Para la evaluacin de la calidad de las semillas se utiliz la metodologa de la Prueba de Germinacin Estndar. El casete de germinacin de semillas es un recipiente rectangular de 30 mm de espesor X 245mm de ancho y 310mm de largo, con doble compartimiento (bastidor central). Posee tapas transparentes de superficies escaneables (210 x 297 mm.) que al cerrarse generan cajas de siembra independientes donde se coloca el sustrato (Fig.1). El casete dispone de suplementos para conducir los ensayos de germinacin y de sanidad de semillas. Las semillas quedan retenidas entre la tapa transparente y el sustrato de manera que durante el transcurso del ensayo se puede observar el crecimiento de las plntulas. Cada tapa posee cuatro nervios internos, equidistantes y paralelos al largo mayor del casete que generan cuatro lneas de siembra. Por debajo de la ltima lnea de siembra, cada tapa presenta un dispositivo antigoteo que deriva el agua de escurrimiento hacia un receptculo colector. El casete posee suplementos especficos para la Prueba de Germinacin, de 4 y 6 mm de altura, que permiten reducir el espacio destinado al sustrato dentro del casete, para su uso en semillas de diferentes tamaos. Los suplementos consisten en una estructura

rectangular de seccin plana y en su superficie poseen un fino rayado de lneas paralelas para frenar la velocidad de escurrimiento vertical del agua. Siembra en sustrato arena En cada caja de siembra del casete se colocaron 5 mm de arena hmeda, previamente tamizada y esterilizada. La arena se compact para lograr una superficie de siembra uniforme. Sobre la arena se coloc un papel de germinacin seco (Schleicher & Schuell, Unisfera (LTD), Argentina) de 65 gr/m, cortado previamente al tamao adecuado, 305mm X 230mm, introduciendo la parte inferior de ste en el receptculo colector de agua del casete. El papel de germinacin se roci con agua hasta que toda la superficie estuvo uniformemente hmeda y saturada (100 % de su capacidad de retencin de agua). Se marcaron las lneas de siembra cerrando la tapa y presionando ligeramente sobre el sustrato as preparado. Luego se colocaron las semillas sobre las lneas marcadas en el papel. Se distribuyeron las 50 semillas por cara del casete colocando 12 semillas en las dos lneas superiores y 13 semillas en las lneas inferiores (Fig. 2). Se dio vuelta el casete y se procedi igual a la otra cara. Se cerr el casete y se coloc en posicin vertical dentro del ambiente de germinacin a 25C de manera que las plntulas al germinar pudiesen expresar su patrn natural de

crecimiento. Para evitar prdidas de humedad del sistema se introdujo el casete dentro de una bolsa de polietileno. Siembra en sustrato papel En el interior del casete se coloc un suplemento de 4 mm de altura. Sobre este suplemento se colocaron dos hojas de papel de germinacin (Schleicher & Schuell, Unisfera LTD. Argentina), introduciendo la parte inferior dentro del receptculo colector de agua del casete. Se roci el papel con agua hasta saturacin. Se realiz la siembra en cada una de las tapas del casete sobre las lneas de siembra formadas por los nervios internos de cada tapa. Se pulveriz la tapa con una fina capa de agua para

facilitar la adherencia de las semillas y distribuyeron las 50 semillas sobre las 4 lneas de siembra. Luego las semillas se cubrieron con una hoja de papel de germinacin que se humedeci con rociador hasta saturacin, quedando retenidas las semillas entre la tapa y el papel de germinacin y se cerr cuidadosamente el casete secando la otra cara. Posteriormente se coloc en posicin vertical en el ambiente de germinacin a 25C y dentro de una bolsa de polietileno para evitar perdidas de humedad del sistema. Durante el periodo de incubacin en la cmara se realizaron observaciones diarias del casete para registrar la produccin y evolucin de las plntulas dentro del mismo. Al finalizar el perodo de incubacin en la cmara de germinacin, se retir el casete para realizar la evaluacin de las plntulas. Se realiz el escaneo de ambas caras del casete para generar el archivo digital del anlisis (Fig.3). Con posterioridad se realiz la evaluacin de plntulas en forma manual y/ o digital desde la pantalla de la PC.
Resultados y Conclusiones

Para ambos sustratos se obtuvo un proceso de germinacin satisfactorio ponindose en evidencia un adecuado comportamiento de las condiciones del ambiente de germinacin proporcionado por el casete a las semillas de soja. Se observ una evolucin normal de las plntulas dentro del casete, en el sentido de alcanzarse el patrn de crecimiento basado en el geotropismo positivo de raz y parte area. Al mismo tiempo se comprob que la cmara de aire dentro del casete, formada por el espacio existente entre la tapa y el sustrato, (donde germinaron las semillas y evolucionaron las plntulas) fue adecuada y no interfiri con la elongacin esperada de las estructuras de las plntulas. Las caractersticas estructurales del casete permitieron un seguimiento diario del proceso de germinacin de las semillas de soja durante su estada en la cmara de germinacin. Esto posibilit la realizacin de escaneos diarios a fin de registrar el avance del proceso germinativo. A diferencia de los recipientes tradicionales usados en la Prueba de Germinacin Estndar, se observ la necesidad de realizar un conteo anticipado de las plntulas, y no esperar el nmero de das prescriptos por las Reglas de la Asociacin Internacional de Anlisis de Semillas (ISTA, 2003) para el Conteo Final de la prueba.

El casete permiti incorporar un gran nmero de ventajas tanto a los anlisis de rutina como a la investigacin. Algunas de estas ventajas fueron mejoras de importancia relacionadas con la rutina de laboratorio, y otras representaron un gran avance en la concepcin misma del anlisis de calidad de un lote de semillas. Entre las primeras se destacaron la posibilidad de optimizar el uso del espacio en los ambientes de germinacin. En este sentido la innovacin permiti multiplicar el nmero de anlisis por unidad de superficie, liberando espacios y aumentando el potencial de trabajo del laboratorio. Por otra parte el invento agiliz el

seguimiento y/o monitoreo visual directo del anlisis en el tiempo, permitiendo al analista realizar un control ms detallado del proceso de germinacin. De esta manera se incorpor al proceso de anlisis la posibilidad de realizar un pronstico sobre la calidad mxima a obtenerse. La determinacin del Primer Conteo se facilit de manera sustancial al no tener que desarmar sustratos de germinacin, sino que se pudo realizar con la observacin directa de las plntulas sin abrir el casete. El Conteo Anticipado de plntulas se realiz con mayor precisin mediante la observacin directa visual de todas las estructuras de las plntulas, tanto en la evaluacin manual como mediante el procesamiento de imgenes. La digitalizacin hizo posible la evaluacin en tiempo real o diferido; el intercambio de informacin entre laboratorios en tiempo real para evacuar dudas sobre la evaluacin de plntulas. El anlisis de germinacin pudo ser llevado a cabo luego de la digitalizacin en la forma manual tradicional extrayendo las plntulas desde el interior del casete, o directamente desde la pantalla de la PC. El uso del casete de semillas en la rutina del laboratorio en forma sistemtica y con la incorporacin de sistemas de identificacin de muestras tales como el cdigo de barras conformar un verdadero proceso de trazabilidad dentro de los laboratorios de anlisis de semillas.