INMUNOLOGIA DEL

EMBARAZO
Dra. Monica Vazquez del Mercado Espinosa
Directora del Instituto de Investigacin en Reumatologa y del Sistema
Msculo Esqueltico, CUCS, UdG

FISIOLOGA DEL
EMBARAZO

IMPLANTACIN
1. APOSICIN

Blastocisto
Sealizacin LIF y
EGF

Pinopodos
2.
ADHESIN
ESTABLE

Microvellosidades
Epitelio
luminal
Glndulas
endometriales

Citotrofoblasto
Sincitiotrofoblasto

Capilares
endometriales
Curr Opin Obstet Gynecol, 2005
Nature Rev, 2002

HORMONAS/EMBARAZO

HORMONAS

PROGESTERO
NA

ESTRADIO
L
PROLACTI
NA

Ejerce un efecto inhibidor sobre linfocitos

citotxicos mediante la sntesis de PIBF
PR en clulas NK y T de mujeres
embarazadas
J Steroid Biochem Mol Biol, 2005
J Immunol, 2008
Reprod Immunol, 2009

Funcin inhibidora sobre la actividad

ltica de las clulas NK. Receptores y
Endocr Rev, 2005

Regulacin del sistema inmune. In vitro

estimula la proliferacin de clulas NK.
Receptores a prolactina
Cell Res, 2004
Endocr Rev, 2005

CORTISOL

Suprime al sistema inmune. Inhibe la actividad

citotxica de las clulas NK
FEBS Lett, 1991
Clin Med Res, 2006

BALANCE TH1/TH2

TH0
Hormonas
progesterona

TH17
Preeclampsia,
AER

IL-4

IFN-

TNF-

IL-3

TH2

TH1
IL-12

IL-2

IL-5

IL-6
IL10

IL-18

EMBARAZO
IL13

Inmunidad
Inmunidad humoral
celular
Clulas NK, NKT
Hum. Reprod, 2007; Placenta, 2007; Immuno Rev, 2006; Steroid Biochem Mol Biol, 2005

RESPUESTA TIPO TH17 EN

EMBARAZO
IL-17

TH17
Niveles perifricos
trimestres del

IL-17 (IL-17A/CTLA-8)
Citocina proinflamatoria
Actividades pleiotrpicas:
neovascularizacin y produccin
de molculas proangiognicas

embarazo ?

Expresin diferencial
en las subpoblciones
del trofoblasto
Angiognesis,
inmunoregulacin en
embarazo

Nature, 2006; Immunity 2006; Placenta, 2007

RESPUESTA TIPO TH17 EN

EMBARAZO

CLULAS T
En etapas tempranas del embarazo, comprenden aprox. del 1020 % en la mucosa uterina
En la decidua, el mayor nmero de linfocitos T corresponde a los
CD8+
Scaife et al, mostr que los linfocitos T CD8 + deciduales en etapas
tempranas del embarazo son capaces de originar citlisis, as
como producir citocinas que regulan la capacidad invasora del
trofoblasto
Hasta la fecha no hay reportes exactos sobre el alorreconocimiento
de antgenos fetales por clulas T CD4+ en embarazo y esto debido
al conflicto que ha emergido con respecto a las respuestas de
clulas T CD8+
Biol Reprod, 2006; J Clin Invest, 2007

CLULAS Treg
Sakaguchi, 1995

enfermedades
autoinmunes

CD25
+

CD4+
GITR

CTLA-4
TGF-
Th3

FOXP3
Programa
gentico

FOXP3

FOXP3

Aluvihare et al, report

que en ausencia de Treg NATURALESTreg ADQUIRIDAS
reg
clulas Treg CD4+CD25+ Contacto celular,
anrgicas,
se produca un rechazo
inmunolgico hacia el secretan pocas
cantidades de IL-2
feto
IL-10
Proporcin ms baja de
clulas Treg CD4+C25+ en
Tr1
AER en comparacin con
abortos inducidos
INFERTILIDAD se ha reportado
una disminucin en la expresin
de FOXP3 a nivel de RNA
mensajero (mRNA)

Eur J Immunol, 2006; Immunol Rev, 2006; Clin Immunol, 2007; Nat Rev Immunol, 2007

CLULAS NK

Clulas NK CD56dimCD16+
90 % en sangre perifrica y el
10 % restante corresponde al
fenotipo bright.
Clulas NK CD56bright CD1670 % en la decidua a diferencia de
las clulas NK perifricas ,
denominndolas clulas NK
uterinas.

J Exp Med. 2004; 200: 951955

Nature. 2002;2:656-663
J Exp Med. 2004; Blood Reviews 2005

FUNCIN DE LAS CLULAS NK EN

EMBARAZO
Control de la placentacin
Fases tempranas
y tardas del
embarazo

% de
clulas
NKu

Decidua
parietalis

Decidua
capsularis

Influencia sobre la mucosa uterina

y arterias en espiral
(ANGIOGNESIS) VEGF, PLGF,
ANG2

Feto
Decidua
basalis
corin
Decidua
marginalis

Clula
NK

Reconocimiento del HLA-C, E y G

expresadas en clulas trofoblsticas
TOLERANCIA SEMIALOINJERTO
FETAL
Tissue Antigens
2004

RECEPTORES DE
LINFOCITOS
CLULAS NK/ T

Placenta, 2006

RECEPTORES DE
LINFOCITOS
RECEPTORES DE CITOTOXICIDAD
NATURAL (NCRs)
NKp30, NKp44, NKp46 y NKp80
Restringidos a clulas NK
Sus ligandos no han sido identificados por completo, se sugieren
que reconocen ligandos virales.
Actualmente se reportado que NKp44 reconoce HLA-G en
decidua
Regulacin Hormonal (lnea celular K562) NKp30 y NKp46
Prolactina-regulacin positiva
Cortisol-regulacin negativa
Expresin disminuida de NCRs (sangre perifrica) en mujeres
con AER
J Exp Med,1998; Human Immunol, 2000; Eur J Immunol , 2001; Clin Exp Immunol , 2005

RECEPTORES DE
LINFOCITOS
NKG2D

A diferencia de los NCRs, la

expresin de NKG2D no est
confinada a las clulas NK, por
lo que se expresa en linfocitos
T CD8+

humano

Activacin

Es un receptor
homodimrico lectina
tipo C teniendo como
ligandos a MICA, MICB,
ULBP y RAE

ratn

Se han sugerido
mecanismos de evasin
inmune en el aloinjerto
fetal entre ligandos MIC/
NKG2D
Scand J Immunol, 2004; J Immunol,2006; Placenta 2006

RECEPTORES DE
LINFOCITOS
CD94/NKG2
Expresado en linfocitos T, NK
Esta familia esta formada por un grupo heterodimrico
compuesto por molculas de las lectinas tipo C, unida
covalentemente a la familia NKG2 (A, B, C, E, F y H)
Los receptores NKG2 se unen a CD94, expresin en
membrana
Reconocimiento de clulas fetales por clulas NKu

NKG2

Las NKu expresan altos niveles de CD94/NKG2A

J. Exp. Med. 2004;200(8):951-955
Scand J Immunol.2004; Semin Immunol, 2006

RECEPTORES DE
LINFOCITOS
ILTs
Conocido como LIR y CD85
ILT2 e ILT4
Distribuida en monocitos, clulas B,
clulas dendrticas, clulas T y clulas
NK
Reconocen ligandos del HLA-G
La disminucin de este receptor en la
interfase materno-fetal provoca citlisis
de las clulas del trofoblasto
Immunol Rev, 2001; Science, 2004; Semin Immunol, 2006

TLR

RESPUESTA TIPO TH17 EN EMBARAZOPRECLAMPSIA

mRNA: TNFa>IL-4>IFNg>IL-10 NHS

mRNA: TNFa>IFNg>IL-10>IL-4 SLE and RA

Clin Exp Rheumatol 2006;24;707-712

CICLO MENSTRUAL

CICLO MENSTRUAL

Wilcoxon, medianas (rangos)

Datos en proceso de publicacin

NK CELLS CD56dimCD16+ AND CD56brightCD16- ARE CORRELATED

WITH PROLACTIN LEVELS DURING MENSTRUAL CYCLE.

Vazquez del Mercado M et al In press AJRI 2010

NK CELLS CD56dimCD16+ AND CD56brightCD16- ARE CORRELATED

WITH PROLACTIN LEVELS DURING MENSTRUAL CYCLE.

Vazquez del Mercado M et al In press AJRI 2010

NK CELLS CD56dimCD16+ AND CD56brightCD16- ARE CORRELATED

WITH PROLACTIN LEVELS DURING MENSTRUAL CYCLE.

Vazquez del Mercado M et al In press AJRI 2010

DIAGRAMA GENERAL
DE ACTIVIDADES

MUJERES EMBARAZADAS
MUJERES
EMBARAZADAS
clnicamente
sanas
clnicamente
seguimiento
1er, 2do ysanas
3er trimestre
seguimiento
1er, 2do y 3er trimestre
(n=13)
(n=13)

Niveles
Niveles
hormonales
hormonales
(progesterona,

(progesterona,
estradiol,
prolactina
estradiol,
prolactina
y cortisol)
y cortisol)
Quimioluminiscencia
Quimioluminiscencia
Sangre perifrica
Sangre
perifrica
sin EDTA
sin EDTA

Sangre perifrica
Sangre
perifrica
con EDTA
con EDTA

Niveles de IL-17
Niveles
de IL-17
ELISA
ELISA
Obtencin de
Obtencin
de
PBMC
PBMC

TINCIN DIRECTA
TINCIN
DIRECTA
% de clulas
T
de
+ clulas
T +)
(CD3+%
CD4
,CD3+CD8
(CD3+CD4+,CD3+CD8+)

TINCIN DIRECTA
TINCIN
DIRECTA
Receptores
de
Receptores
inhibicin
CD4de
inhibicin
CD4
CD94/NKG2
e ILT2
CD94/NKG2
(IFM) e ILT2
(IFM)
Patrn de
3 colores
Patrn
de 3 colores
FITC/PE/PCy5
FITC/PE/PCy5

TINCIN DIRECTA
TINCIN INTRACELULAR
TINCIN
DIRECTA
% de clulas
NK
TINCIN INTRACELULAR
% -de
clulas
+
NK
(CD3
CD56
, CD3
% de clulas Treg
dim -CD56
++, CD3
- (CD3
CD56 CD16 , CD3
%
de +clulas
(CD4
CD25+,Treg
+ bright
CD56dim
CD16
, )CD3CD16
+
+
+
(CD4
CD4 CD25+CD25
Foxp3,+)
CD56brightCD16-)
+
+
+
TINCIN
TINCIN DIRECTA CD4 CD25 Foxp3 )
TINCIN
TINCIN
DIRECTA
DIRECTA
Receptores
de
DIRECTA
Receptores
Receptores
de
inhibicin de
Receptores
inhibicin
activacin de
CD94/NKG2
e ILT2
activacin
CD94/NKG2
NKp30,
NKp44,
(IFM) e ILT2
NKp30,
NKp44,
(IFM)
NKp46
y NKG2D
Patrn de
3
NKp46(IFM)
y NKG2D
Patrn
coloresde 3
colores
Patrn(IFM)
de 3
FITC/PE/PCy5
Patrn
FITC/PE/PCy5
coloresde 3
colores
FITC/PE/PCy5
FITC/PE/PCy5
Citometra de flujo
Citometra de flujo

RESULTADOS

NIVELES HORMONALES (n=13)

A)

C)

B)

D)

Los resultados se expresaron como mediana (rangos). Las comparaciones se realizaron

mediante la prueba estadstica Wilcoxon. p 1= Diferencias entre el primero y segundo trimestre
del embarazo, p2= Diferencias entre el primero y tercer trimestre del embarazo. *p0.05,
**p0.01, ***p0.001. Los niveles hormonales fueron expresados como concentraciones en

Porcentajes de CLULAS Treg

CD4+CD25+ en los tres trimestres del
embarazo (n=13)

Los resultados se expresaron como mediana (rangos). Las comparaciones se realizaron mediante la prueba
estadstica Wilcoxon. p1= Diferencias entre el primero y segundo trimestre del embarazo, p 2= Diferencias entre el
primero y tercer trimestre del embarazo. Los linfocitos se expresaron como porcentaje (%), *p0.05, **p0.01.

Porcentajes de CLULAS Treg

CD4+CD25+FOXP3+ en los tres trimestres del
embarazo (n=13)

Los resultados se expresaron como mediana (rangos). Las comparaciones se realizaron mediante la prueba
estadstica Wilcoxon. p1= Diferencias entre el primero y segundo trimestre del embarazo, p 2= Diferencias entre el
primero y tercer trimestre del embarazo. Los linfocitos se expresaron como porcentaje (%) , **p0.01.
Andrea Steinborn 200

Comparacin de los niveles hormonales, porcentaje de

linfocitos y expresin de receptores de activacin e
inhibicin durante el primero, segundo y tercer trimestre
del embarazo (n=13)

Los resultados se expresaron como mediana (rangos). Las comparaciones se realizaron mediante la prueba
estadstica Wilcoxon. p1= Diferencias entre el primero y segundo trimestre del embarazo, p 2= Diferencias entre el
primero y tercer trimestre del embarazo. *p0.05, **p0.01, ***p0.001. Los niveles hormonales y de IL-17 fueron
expresados como concentraciones en suero, los linfocitos en porcentaje (%) y la expresin de receptores de activacin

Correlacin negativa entre los niveles de

progesterona con el % de clulas Treg
CD4+CD25+ en el segundo trimestre del
embarazo

Las correlaciones se realizaron mediante la prueba de Spearman rho. *p0.05, **p0.01. Los niveles hormonales
fueron expresados como concentraciones en suero, los linfocitos en porcentaje (%).

Correlacin entre los niveles prolactina y cortisol con el porcentaje de

linfocitos y expresin de receptores de activacin/inhibicin e IL-17
durante el primero, segundo y tercer trimestre del embarazo (n=13)

Las correlaciones se realizaron mediante la prueba de Spearman rho. *p0.05, **p0.01. Los niveles hormonales y de IL-17 fueron expresados
como concentraciones en suero, los linfocitos en porcentaje (%) y la expresin de receptores de activacin e inhibicin se mostraron como
intensidad de fluorescencia media (IFM).

Correlacin entre los niveles progesterona y estradiol con el porcentaje

de linfocitos y expresin de receptores de activacin/inhibicin e IL-17
durante el primero, segundo y tercer trimestre del embarazo (n=13)

Las correlaciones se realizaron mediante la prueba de Spearman rho. *p0.05, **p0.01. Los niveles hormonales y de IL-17 fueron expresados
como concentraciones en suero, los linfocitos en porcentaje (%) y la expresin de receptores de activacin e inhibicin se mostraron como
intensidad de fluorescencia media (IFM).

Serum levels of IL-17 are increased in the third trimester of pregnancy

in healthy women with term labor.

Vazquez del Mercado M et al In press AJRI 2010

CONCLUSIONES
Observamos diferencias significativas en la poblacin de clulas
Treg CD4+CD25+ y CD4+CD25+FOXP3+, detectando mayor
porcentaje en el primer trimestre comparado con el segundo y
tercer trimestre del embarazo, probablemente esto refleje el
papel que esta subpoblacin puede tener en el mantenimiento
de la tolerancia durante el embarazo, ya que fue la nica
poblacin celular que present cambios consistentes.
Existi un incremento significativo de IL-17 en el tercer trimestre
del embarazo. Estos sern los primeros datos reportados sobre
los cambios en los niveles de IL-17 durante el embarazo a nivel
perifrico.

CONCLUSIONES
Obtuvimos correlaciones entre ciertas hormonas (progesterona,
estradiol, prolactina y cortisol) con subpoblaciones celulares
(Treg CD4+CD25+, CD3-CD56+, CD3-CD56dimCD16+ y CD3CD56brightCD16-) y receptores (NKp46 e ILT2) en determinados
trimestres del embarazo. Sin embargo estas correlaciones no
fueron consistentes debido a que este trabajo de investigacin
fue un estudio descriptivo-longitudinal lo que limita la
interpretacin funcional de la influencia hormonal sobre
poblaciones celulares que puedan esclarecer estas complejas
interacciones.

Methylation analysis in JEG-3 cells

Vazquez-Del Mercado M et al in preparation 2010