Introduccin

Los estudios de toxicidad constituyen una parte muy importante dentro del
desarrollo de un nuevo frmaco y se extienden prcticamente a lo largo de
todo el mismo. El objetivo de los mismos es evaluar el riesgo o peligro
potencial que un agente qumico o fsico puede ocasionar sobre la salud
humana cuando es objeto de exposiciones agudas o crnicas.

No se limitan slo a los frmacos sino que la mayor parte de las sustancias
qumicas industriales son objeto de estudios de toxicidad iguales o ms
complejos que los realizados con los nuevos frmacos.
Ecotoxicologa
Ciencia que estudia los efectos de las sustancias txicas sobre
los organismos combinando las tcnicas ecolgicas y tcnicas.

La toxicidad directa sobre los organismos

Las alteraciones del medio ambiente en el cual viven los
organismos
Qu es un bioensayo de toxicidad?
Prueba para establecer la naturaleza y la magnitud del efecto
que producir un agente dado cuando los organismos o sistemas
biolgicos son expuestos a l.

Toxicidad aguda
Toxicidad crnica
Para qu sirven?
Para evaluar los efectos nocivos que producen sobre los seres
vivos diferentes tipos de agentes externos que estn presentes
en el ambiente.

Si la contaminacin es capaz de producir un dao a los seres

vivos que estn en contacto.
Toxicidad aguda

De 48 96 horas
Mide los efectos de sustancias en la supervivencia de la especie.
CE50

Toxicidad crnica
De acuerdo a la vida de la especie utilizada.
Mide el desarrollo o crecimiento y el xito o falla de la
reproduccin.
Artemia salina
Crustceo perteneciente a la Subclase Branchiopoda.
Orden Anostraca.
Cuerpo delgado, alargado y est cubierto por un caparazn
blando.
*Cabeza
*Trax
*Abdomen
Su tamao oscila entre 7 y 12 mm de longitud.
Distribucin amplia (excepto Antrtida)
Capacidad de adaptacin y tolerancia a diversas situaciones.
*Aguas salinas
*Amplio rango trmico
Caractersticas de los animales para
utilizarse en bioensayos
De amplia distribucin en el pas o de importancia comercial
Disponibilidad
Tamao suficientemente pequeo
De fcil cultivo
Susceptibilidad a exposiciones con sustancias xenobiticas.
Objetivo
Determinar la CE50 y la potencia relativa del cloruro de mercurio
(II) y del sulfato de plata por medio del bioensayo en Artemia
salina L. para determinar el grado de toxicidad de los mismos en
el sistema de prueba.
Procedimiento
Incubacin de los huevecillos
Adicionar los huevecillos
en la pecera de
Armar el dispositivo incubacin (aprox. 10 mcg
de incubacin de huevecillos) colocar en
la zona obscura y dejar
incubar durante 24 h.

Preparar 40 ml de agua de
mar artificial, pesando 12.2 Conectar los
g de sal marina y disolver
en 400 ml , adicionar una dispositivos de luz y
gota de anticloro y dejar aireacin
reposar 1 min

Tomar 300 ml del

Colocar agua de la
agua de mar
llave en la pecera
artificial y colocar en
mayor a una temp.
la pecera de
aprox. de 26-28C
incubacin.
 Realizacin del bioensayo

Se observar el
Se colocarn 10
movimiento de los
organismos en cada uno
organismos por un
de los tubos de ensaye
periodos de 120 min

Al trmino del periodo de observacin se contarn

las artemias que sobrevivieron:
a)Las artemias que presentan movimiento *Vivas
b)Las artemias que permanecen inmviles *Muertas
Anlisis Probit
Para el calculo de CL50, CE50 generalmente se usa el anlisis Probit,
se deben de tener:

Concentracin de la sustancia o dosis

Nmero de individuos (n)
Nmero de organismo muertos o afectados (r)
Porcentaje de efecto (p)
Para establecer una relacin lineal entre el estimulo y su efecto, es necesario transformar :
Dosis a su logaritmo
Mortalidad a valores probit

Ya que si graficamos los porcentajes de mortalidad contra logaritmo de la dosis,

obtenemos una curva sigmoidea. En cambio cuando graficamos logaritmos dosis contra
unidades probit, obtenemos una lnea recta.
Calculo de DL50 o DE50
Mtodo grafico
Realizar la curva dosis-respuesta cuantal.
Porcentaje de individuos que presentan la respuesta contra
logaritmo de la dosis (concentracin del compuesto en este caso).
 Realizar la grfica de Unidades Probit vs Log dosis
Ejemplo
Sustancia: Cloruro de mercurio(II), Dicromato de potasio, etc
Numero de Numero de
Dosis (mg/Kg) artemias artemias que P=r/n %E=p*100
utilizadas (n) murieron (r)
0.0702 6 1 0.16 16
0.0948 6 2 0.33 33
0.1547 6 3 0.5 50
0.1764 6 4 0.66 66
0.1907 6 5 0.83 83
0.222 6 6 1 100
LnCO %E
-2.657 16
-2.356 33
-1.866 50
-1.735 66
-1.657 83
-1.505 100
 Unidad
LnCO
probit
-2.657 4.01
-2.356 4.56
-1.866 5
-1.735 5.41
-1.657 5.95
-1.505 8.09
Referencias consultadas
Daz M, Bustos M, Espinoza A. Pruebas de toxicidad acutica: fundamentos y mtodos.
Bogot: Universidad Nacional de Colombia; 2004.
Mendoza N. Farmacologa Mdica. Mxico: Editorial Medica Panamericana; 2008.
Katzung, Farmacologa bsica y clnica, 10 Edicin, Editorial Manual Moderno, 2007.
http://www.cm.colpos.mx/moodle/file.php/13/BIOENSAYO/EL_BIOENSAYO_EN_ENTOM
OLOGIA.pdf