Refractometría

Refractometría
Es una técnica analítica que consiste en la medida del
índice de refracción de un líquido con objeto de
investigar su composición si se trata de una disolución
o de su pureza si es un compuesto único.
Tipos de refractómetros
 Existen dos tipos de refractómetros en función
de la detección del índice de refracción;
sistemas transparentes y sistemas de reflexión.
 Los refractómetros Abbe usan los sistemas
transparentes, mientras que los refractómetros
digitales usan los sistemas de reflexión
Sistema transparente
Si la muestra es de baja
concentración el ángulo de
refracción es grande (vea
"A”) debido a la gran
diferencia en el índice de
refracción entre el prisma y
la muestra.
Si la muestra es
concentrada el ángulo de
refracción es pequeño (vea
“B”) debido a la pequeña
diferencia en el índice de
refracción entre el prisma y
la muestra
Sistemas de reflexión
La medida del índice de
refracción permite
determinar la concentración
de disoluciones acuosas.
El refractómetro es el
aparato que se utiliza para
determinar índices de
refracción.
El índice de refracción de
un liquido es relativo a su
concentración 8°Brix o
porcentaje de azúcar).
 También, es posible catalogarlos en tres grupos
de acuerdo a su fundamento físico:
 Aparatos que miden el ángulo critico (Pulfrich,
Abbe)
 Aparatos que miden directamente la desviación
de los rayos al pasar a través de la sustancia se
detalla en forma de prisma o colocada en un
recipiente prismático (Goniómetro)
 Aparatos basados en la interferencia de luz
(interferómetro de Raileigh)
Refractómetro de abbe
 Este refractómetro, basado
también en el principio del ángulo
límite, está ideado para realizar la
operación con comodidad y
rapidez. .Requiere sólo
cantidades muy pequeñas de la
muestra y da una precisión del
orden de ±2 x l0-4. La escala está
graduada directamente en índices
de refracción para las líneas D a
20° C. En su forma usual se
puede usar con luz de sodio . Los
modelos de alta precisión se
limitan en general al uso de luz de
sodio, aunque los fabricantes
suministran tablas de corrección
para las líneas C y F.
 Refractómetro de inmersión

Es el más simple de todos.

Requiere sólo 10-15 ml de
muestra. El prisma simple va
montado en un telescopio que
contiene el compensador y el
ocular. La escala se sitúa
debajo del ocular dentro del
tubo. La superficie inferior del
prisma se sumerge en un
pequeño vaso que contiene a la
muestra, con un espejo debajo
para reflejar la luz hacia arriba a
través del líquido.
Refractómetro de pulfrich

 El refractómetro de Pulfrich es útil para la

medición del índice de refracción de muestras
sólidas o líquidas. Con gran cuidado en el uso
del instrumento y con los ajustes mejores
posibles, se alcanza una precisión del orden de
1 x 10-4 en el índice de refracción. La diferencia
del índice entre dos muestras cuyos índices
difieren muy poco, se puede determinar con un
error de ± 2x 10-5.
 APLICACIONES
La Refractometría tiene varias aplicaciones en el
aspecto cualitativo y cuantitativo, en el análisis de los
alimentos.
Esta técnica es usada con fines de identificación y
caracterización de aceites y grasas, en el control de
la pureza de los alimentos, en la medición de jugos
azucarados, determinación aproximada del contenido
de alcohol en licores, concentraciones de azúcar
,entre otros.
Otras aplicaciones se relacionan con la variación de
la concentración de disoluciones. Así, la
concentración en azúcar, salmueras y ácidos es fácil
de seguir mediante refractometría.
 Espectrofotometría

“Espectro” Espectro de radiación electromagnética

“Foto” Luz visible

Metría” Medición

El espectrofotómetro es un instrumento que permite

comparar la radiación absorbida o transmitida por una
solución que contiene una cantidad desconocida de
soluto, y una que contiene una cantidad conocida de la
misma sustancia
 ESPECTROFOTÓMETRO
 Un espectrofotómetro típico posee cuatro
componentes básicos:
1. Una fuente de radiación, que tiene intensidad
constante en el rango de longitud de onda que cubre
( usualmente es lámpara de tungsteno para luz
visible, y deuterio para ultravioleta).
2. Un compartimiento para la muestra, es donde
tiene lugar la interacción con la materia (debe
producirse donde no haya absorción ni dispersión de
las longitudes de onda).
3. Un monocromador, que separa la banda de
longitud de onda deseada del resto del espectro y la
dispersa al compartimiento de la muestra.
4. Un fotodetector, que mide cuantitativamente la
radiación que pasa por la muestra.
LUZ VISIBLE

 Es una región muy

estrecha pero la más
importante, ya que nuestra
rutina es sensible a las
radiaciones de estas
frecuencias.
 A su vez, se subdivide en
seis intervalos que definen
los colores básicos (rojo,
naranja, amarillo, verde,
azul y violeta).
 Espectrofotómetro

 La luz “monocromática”
atraviesa la muestra, y
llega al detector. Las
mediciones fotométricas se
hacen en base a la relación
entre la potencia de luz
que alcanza al detector
cuando está interpuesta la
muestra (P) y cuando no lo
está (P0) o cuando está
interpuesto un “blanco”.
Celdas
 En un primer plano, dos
de cuarzo aptas para el
trabajo con luz
ultravioleta; en segundo
plano, de plástico, para
colorimetría (es decir,
empleando luz visible).
Tipos de Espectrofotometría
Transmitancia y absorbancia
 La transmitancia se define como
T = P / P0 y la absorbancia como
A = - log T = - log P / P0
Espectrofotómetro puede registrar la luz
en el rango de UV o del visible
Al campo de luz UV de 200 a 400 nm se le conoce
también como rango de UV cercano , la
espectrofotometría visible solamente usa el rango
del campo electromagnético de la luz visible , de 400
a 800 nm.
LEY DE LAMBERT Y BEER
 La ley explica que hay una relación exponencial
entre la transmisión de luz a través de una sustancia
y la concentración de la sustancia, así como también
entre la transmisión y la longitud del cuerpo que la
luz atraviesa.
 Si conocemos l y A, la concentración de la sustancia
puede ser deducida a partir de la cantidad de luz
transmitida.
A = ε·c·l
 Donde:
 A = absorbancia
  = Coeficiente de extinción molar.
 l = longitud de la celda.
 Aplicaciones

 Las aplicaciones principales son:

 Determinar la cantidad de concentración en una
solución de algún compuesto utilizando las
fórmulas ya mencionadas; ayudar en la
determinación de estructuras moleculares;
 La identificación de unidades estructurales
específicas, ya que estas tienen distintos tipos de
absorbancia (grupos funcionales o isomerías);
 Determinar constantes de disociación de
indicadores ácido-base.
Utilización de la
luz para
desinfectar
 Utilización de la luz para desinfectar

 La luz ultravioleta (UV) es una alternativa de

desinfección al uso del cloro y ozono en muchas
aplicaciones de tratamiento de aguas potables y
residuales. UV provee desinfección efectiva sin
producción de subproductos de desinfección
problemáticos. Se presenta información sobre el
mecanismo de aplicación de UV para desinfección
de agua potable.
 El sistema de desinfección con luz ultravioleta
 (UV) transfiere energía electromagnética desde
 una lámpara de vapor de mercurio al material
 genético del organismo (ADN o ARN). Cuando
 la radiación UV penetra en las paredes de la
 célula de un organismo, esta destruye la
 habilidad de reproducción de la célula. La radiación
UV, generada por una descarga
 eléctrica a través de vapor de mercurio, penetra
 al material genético de los microorganismos y
 retarda su habilidad de reproducción.
Aplicaciones en la industria de alimentos
 La radiación UV se utiliza en diferentes sectores de
la industria de alimentos, debido al efecto nocivo
que causa sobre el ADN de muchos
microorganismos.
 Asimismo, es elegida por tratarse de un proceso que
no altera las propiedades organolépticas de los
productos y reduce el uso de sustancias químicas.
Se emplea para la preservación de alimentos
líquidos y sólidos, pero en estos últimos su
aplicación es efectiva a nivel
 superficial.
 Alimentos líquidos
 La radiación UV se utiliza para desinfectar agua, ya
sea para ser comercializada como tal o en la
industria de bebidas.
 se utiliza para desinfectar y aumentar la vida útil de
jugos de frutas y verduras.
Alimentos sólidos
 Se pueden tratar distintos tipos de carne (pescado,
pollo, carne bovina), antes de su refrigeración, con
luz UV en la superficie para reducir la carga
microbiana en dos o tres ciclos logarítmicos
(dependiendo de la dosis aplicada), lo que puede
aumentar varios días su vida útil.
 Harinas y cereales, donde la luz UV podría reducir la
carga microbiana, especialmente, la
descontaminación patógenos como Bacillus cereus.
 También es importante su aplicación en aquellos
productos que no poseen en su proceso alguna
etapa de reducción de microorganismos, como el
tratamiento térmico.
  Tarrinas de yogur
Desinfección de envases
 Envases Gable-Top

 Tapones y film de sellado

 Envases para bebidas

 Reducir pérdidas por contaminaciones cruzadas en las cintas de transporte

Desinfección de cintas de
 Reducir los tiempos de limpieza y paradas de producción
transporte

 Desinfección superficial de quesos

Desinfección de alimentos
 Productos de pastelería

 Huevos frescos

 Frutas y vegetales, frutos secos

 Contenedores alimentarios antes de la reutilización para la reducción del riesgo de contaminación

Desinfección en equipos y cruzada
maquinaria
 Cuchillas de corte (desinfección durante su uso)

 Superficies de trabajo
Sistemas para medicina y
 Desinfección en frío de proteínas
laboratorio
 Desinfección de placas Petri antes de la siembra de microorganismos

 Instrumental médico en uso

 Maquinaria que está en contacto con el producto: loncheadoras, cortadoras de pan, rebanadoras.
Plantas de procesos
 Utilización de luz para desinfectar agua
 El tratamiento de agua con luz ultravioleta es un método único, ya que
realiza una desinfección mediante un proceso físico, es decir, no emplea
productos químicos y mantiene el agua pura físicamente.
 La desinfección con luz UV es eficaz contra todos los
microorganismos.
 Produce una enorme mejora de la calidad del agua y el aire.
 Reduce el cloro combinado en el agua y el ambiente.
 No se forman subproductos químicos indeseados (THM, AOX, …).
 Tiene bajos costes de inversión, funcionamiento y mantenimiento,
aportando altos rendimientos y eficacia.
 Es una tecnología verde y muy segura, ya que no es posible la sobre-
dosificación y no requiere almacenamiento ni manipulación de productos
químicos.
 foto catalizador
El equipo
ultravioleta con lámparas
 Ventajas
 No produce alteraciones organolépticas en la mayor
parte de los alimentos.
 Método físico en el cual la energía es el medio
germicida, sin generar productos secundarios
indeseables.
 El tratamiento no produce residuos químicos ni
radiación.
 Es efectivo para desinfección de diversas superficies.
 Es eficaz para la inactivación de muchos
microorganismos
 Es de fácil aplicación.
 Bajo costo y mantenimiento.
 Desventajas
 Los organismos protegidos por sólidos (partículas,
polvo o cubiertas) no son afectados.
 Poca penetración en materiales sólidos y en
líquidos no transparentes.
 La exposición prolongada a irradiación UV puede
dañar la vista y causar quemaduras.
 La unidad o equipo de UV se debe colocar tan
cerca como sea posible al producto a tratar.
 Vale recordar que a pesar de ser una tecnología
aplicable a muchos alimentos, es necesario
tener en cuenta la composición de estos
productos, ya que se requieren dosis distintas de
radiación UV según la matriz (composición
química y ordenamiento estructural) propia del
alimento. Por esto, sería importante realizar
ensayos de laboratorio de rutina, a fin de evaluar
la eficacia de la técnica.
CONCEPTO Y DESCRIPCIÓN DE LA TÉCNICA
 El uso de la tecnología UV con fines de
desinfección implica la región ultravioleta del
espectro electromagnético, con un rango de
longitud de onda entre 100 y 400 nm. Éste se
puede subdividir (Bolton 1999) en:
 UV de onda corta UV-C entre 200 y 280 nm.
Rango germicida
 UV de onda media UV-B entre 280 y 315 nm.
 UV de onda larga UV-A entre 315 y 400 nm.
 La máxima eficiencia para la desinfección se
sitúa en 254 nm.
 La radiación UV produce cambios fotoquímicos,
cuyos efectos pueden variar según la especie de
 A fin de lograr la inactivación microbiana, la
exposición a la radiación UV debe ser al
 menos 400 J/m2 en toda la superficie del
producto. Los factores críticos incluyen la
 transmisividad del producto, la configuración
geométrica del reactor, la potencia, la longitud
 de onda y la disposición física de la fuente de
UV, el perfil de flujo de producto y la
 trayectoria de la radiación.
 La radiación emitida se mide en Watts (W) y la