PROF.

FANNY MARTÍNEZ
2014
 Historia
 Propiedades deseables de un antibiótico
 Clasificación
 Mecanismos de acción
 Pasteur, 1887. Estudia sobre el antrax

 Paul Erlich, 1854-1915. Rojo tripan. Analizan compuestos

derivados del arsenico sobre conejos con sífilis, descubrieron
la arsfenamina (Salvarsan) que allana el camino para los
estudio de toxicidad selectiva y potencial terapéutico.

 Domagk, 1932. Descubre Prontosil (sulfunamidas) Y en 1939

recibió el premio Nobel en Fisiología por este descubrimiento
 Fleming, en los años 20 descubre que la lisozima de las lagrimas
tenían actividad antibacteriana y en 1928 redesescubre la
penicilina (Ernest Duchesne 1896).
 Fleming, Florey y Chain recibieron el premio Nobel de Medicina en
1945 por el descubrimiento y producción de la penicilina.
 En 1944 Selman Waksman descubren la estreptomicina producida
por el Streptomyces griseus, en 1952 recibe el premio Nobel
 En 1953 se aislaron microorganismos que producían Cloranfenicol,
Tetraciclina, Terramicina y Neomicina
 Son sustancias químicas derivadas de o producidas
por distintas especies microorganismos, que en
pequeñas concentraciones son capaces de suprimir
la reproducción o la vida de otros microorganismos.

 Ampliamente distribuidos en la Naturaleza

 Desempeñan un papel importante en la regulación

de la población microbiana de suelos, aguas y aguas
servidas
Fuentes microbianas de algunos antibióticos
Microorganismo Antibiótico
Bacterias Especies de Cloranfenicol
Streptomyces Eritromicina
Kanamicina
Especie de Gentamicina
Micromonospora
Especie de Bacillus Bacitracina
Hongos Especies de Penicilina
Penicillium
Especie de Cefalosporinas
Cefalosporium
 El descubrimiento de los antibióticos
revolucionó la sanidad, y se ha llegado a decir que
es el gran avance en materia de salud desde la
adopción de la desinfección.
se les denomina "balas mágicas", porque hacen
blanco en los microorganismos sin perjudicar al
hospedero.
 Vía de administración : Oral, intravenosa e Intramuscular
 Actúan destruyendo los gérmenes o patógenos o
interrumpiendo su ciclo reproductor, con lo que se reduce su
numero y el sistema-inmunitario los puede eliminar.
 Reducen el tiempo durante el que las bacterias patógenas
son contagiosas.
 REACCIONES ADVERSAS
Fiebre y nauseas, reacciones alérgicas Perdida de apetito,
diarrea o colitis, visión borrosa sensibilidad a la luz solar ,
alteración del sistema nervioso y dificultad respiratoria solo
en casos graves
 Conocimiento bibliográfico de la resistencia Factores del
 Cultivo y antibiograma. microorganismo
 Biodisponibilidad.
 Vía de administración.
 Dosificación del medicamento. Factores del
antibiótico
 Duración del tratamiento.
 Disponibilidad del medicamento.
 Edad y peso del paciente.
 Embarazo.
 Enfermedades concomitantes. Factores del
 Alergias. paciente
 Condiciones generales del paciente.
 Gravedad del caso.
 Estado inmunológico del paciente.
 Especificidad
 Elevada potencia biológica
 Toxicidad selectiva
 Interacción
 Farmacología
 Propiedades físicas y químicas
 Bajo costo
 Biológicos
 Por su origen Sintéticos
Semi-sintéticos

Amplio
 Espectro de acción Intermedio
Corto
Bactericida
 Actuación Bacteriostático
 Síntesis de la Pared Celular
Síntesis Proteica
 Mecanismo de acción
Síntesis de los ácidos Nucleicos
Desorganización de la Membrana
Celular
Antimetabolítos

 Estructura química En familias : con características

comunes en su estructura,
mecanismo de acción y espectro de
acción
Antibióticos que Inhiben la Síntesis de
la Pared Celular
 Estructura Química
Constituidos por un anillo β-Lactámico de cuatro elementos
que se unen a un segundo anillo
 Mecanismo de acción: inhiben las enzimas de
transpectidación que participan en el entrecruzamiento de
las cadenas de polisacaridos del peptidoglicano al
interaccionar con las PBP e inducir un efecto autolítico.

 Tipo de acción: bactericida

 Representantes: Penicilinas, Cefalosporinas,

Monobactámicos, Carbapenemes, Inhibidores de
betalactamasas.
PG MC
Formación del
peptidoglicano
Piruvil-
transferasa
P --- P UDP UDP
-

Citoplasma Fosfoenol
piruvato

Transpeptidación y
transglicosilación UDP UDP

UDP UDP
P --- P

Transportador
-

PBP NAG NAM L-Ala D-Glu D-Lis D-Ala

PG MC
Acción de los Betalactámicos
Piruvil-
transferasa
P --- P UDP UDP
-

Citoplasma Fosfoenol
piruvato

Transpeptidación y
transglicosilación UDP UDP

UDP UDP
P --- P

Transportador
-

Betalactámico PBP NAG NAM L-Ala D-Glu D-Lis D-Ala

Clasificación de los Betalactámicos
 Penicilinas
› Penicilinas: Penicilina G
› Aminopenicilinas: Amoxicilina, Ampicilina
› Ureidopenicilinas: Piperacilina
› Carboxipenicilinas: Carbenicilina
› Estables a penicilinasas: Oxacilina, Meticilina

 Cefalosporinas
› Primera Generación: Cefalotina
› Segunda Generación: Cefamandol, Cefuroxime, Cefoxitin
› Tercera Generación: Cefotaxime, Ceftazidime, Ceftriaxone
› Cuarta Generación: Cefepime
 Monobactámicos: Aztreonam

 Carbapenems: Imipenem, Meropenem, Ertapenem

 Combinaciones con inhibidores:

Amoxicilina/Clavulánico, Piperacilina/Tazobactam,
Ampicilina/Sulbactam
 Glicopéptidos

Mecanismo de acción: Inhiben la síntesis del

peptidoglicano en su fase final, en la etapa más externa de la
pared celular. Se fija a la porción D-ala-D-ala terminal de las
cadenas de pentapéptidos que son parte de los precursores
disacaridos. Esta unión inhibe la incorporación de nuevas
subunidades al petidoglicano

Representantes: Vancomicina, Teicoplanina

Tipo de acción: Bactericida
 MECANISMO
PG MC
DE
ACCIÓN
DE LOS
GLICOPÉPTIDOS

P --- P
-
P --- P
-
INHIBICIÓN
D-Lis D-Ala TRANSGLICOSILACIÓN
NAG NAM L-Ala D-Glu
Antibióticos que afectan la membrana
celular
 Polimixinas
Mecanismo de acción: los grupos aminos libres actúan
como detergentes catiónicos, se enlazan con los fosfolípidos
de la membrana celular y desorganiza la superficie externa de
la membrana celular

Tipo de acción: Bactericida

Polimixina

Lípidos de
membrana
Antibióticos que inhiben la síntesis
proteica a nivel de la sub-unidad 50S
ribosomal
 Macrólidos-Lincosamidas-
Estreptograminas

Compuestos químicos diferentes, uso y espectro similar

Mecanismo de acción: Se unen a la porción ARNr 23S de

la subunidad 50S del ribosoma.
Se inhibe la síntesis proteica por bloqueo de la iniciación, la
transferencia o la translocación peptídica
 Los macrólidos presentan anillos de lactona de 14,
15 o 16 átomos que tienen unidos uno o más
deoxiazúcares.
› 14 átomos: Roxitromicina, Claritromicina,
Eritromicina, Oleandomicina y Diritromicina.
› 15 átomos: Azitromicina.
› 16 átomos: Midecamicina, Josamicina,
Micocamicina, Rokitamicina y Espiramicina.
 Tipo de actividad: Bacteriostático
 Macrólidos

Estructura química de los Macrólidos

QUIMIOTERAPIA ANTIMICROBIANA
MACROLIDOS
 Son derivados alquilos de la prolina unidos a
un derivado sulfurado del azúcar octosa
 Representantes: Lincomicina y Clindamicina
 Tipo de acción: Bacteriostático.
 Están conformados por dos componentes que
actúan sinérgicamente
 Tienen acción bactericida
 Incluyen a Virginiamicina, Pristinamicina y
Quinupristin/Dalfopristin

Quinupristin Dalfopristin
 Fenicoles

Mecanismo de acción: unión reversible a la subunidad

50S. Bloquea la acción de la peptidil transferasa,
interrumpiendo la formación de los enlaces peptídicos

Tipo de acción: Bacteriostático y bactericida

Representante: Cloramfenicol

Cloranfenicol
QUIMIOTERAPIA ANTIMICROBIANA

Antibióticos que inhiben la

síntesis proteica a nivel de la sub-
unidad 30S ribosomal
 Mecanismo de acción: Inhiben la fase de elongación de
la síntesis proteica bacteriana, fijándose a la subunidad 30S
del ribosoma y evitando que el tRNA- pueda unirse al
ribosoma.
 Tipo de acción: Bacteriostático
 Representantes: Tetraciclina, Doxiciclina

Tetraciclina
Formados por un núcleo amino-ciclitol unidos por enlaces
glucosídicos a dos o mas amino-azucares
QUIMIOTERAPIA ANTIMICROBIANA

Antibióticos que inhiben la síntesis

de metabolitos esenciales
 Mecanismo de acción: Inhiben la síntesis de
folatos, los cuales son indispensables para la síntesis
de los ácidos nucleicos.
› Las sulfamidas compiten con el ácido para-
aminobenzoico (PABA) como sustrato, por el sitio activo
de la enzima dihidropteroato sintetasa.
› Trimetropim inhibe la enzima dihidrofolato reductasa.
 Tipo de acción: bacterostática (por separado),
bactericida (combinados)
Estructura Química de las Sulfonamidas, nombre
genérico que se da a los derivados del para-aminobenceno
X-Pteridina Acido Paraaminobenzoico

Sulfonamidas

Dihidropteroato sintetasa

Dihidropteroato
Trimetroprim
Dihidrofolato
Dihidrofolato reductasa

Tetrahidrofolato

Purinas
QUIMIOTERAPIA ANTIMICROBIANA

Antibióticos que inhiben la

replicación de ADN
Son derivados del ácido nalidixico, utilizados desde 1960 para
el tratamiento de infecciones urinarias
Mecanismo de acción: interactúan con los complejos
ADN-topoisomerasas e impiden el movimiento de la
horquilla de replicación, resultando en la muerte celular.
Inhiben la topoisomerasa tipo II (girasa) y la topoisomerasa
tipo IV

Representantes: Acido Nalidixico

(quinolona), Ciprofloxacina, Levofloxacina,
Norfloxacina (Fluoroquinolonas)

Tipo de acción: Bactericida

 Son compuestos que contienen un sistema de anillo
aromático atravesado por un largo puente alifático.
Algunos aparecen en la naturaleza, la mayoría son
derivados semi-sintéticos
 Mecanismo de acción: Inhibe la RNA polimerasa
bacteriana dependiente de DNA.
 Representantes: Rifampicina, rifacilina
 Tipo de acción: Bactericida
Prof. Fanny Martínez
Junio 2014
 Resistencia Bacteriana

 Mecanismos de Resistencia

 Pruebas de susceptibilidad de los

antibióticos
 DEFINICIONES

• RESISTENTE: cepa variante surgida por cambios

genéticos a partir de un fenotipo silvestre
originalmente sensible.

• INSENSIBLE: cepas cuyo fenotipo silvestre le

permite “resistir” a un determinado antibiótico.
 Es un fenómeno de selección biológica que tiene relación
directa con la evolución de las especies.

 El uso incorrecto e indiscriminado de los antibióticos en los

seres humanos y animales aumentan la presión selectiva
sobre las bacterias

 Las bacterias capaces de resistir a los antibióticos sobreviven

y propagan estas características mediante transferencia
genética horizontal
RESISTENCIA BACTERIANA UN
PROBLEMA MULTIFACTORIAL
¿CÓMO ADQUIEREN RESISTENCIA LAS BACTERIAS?

 Resistencia Natural o Intrinseca

 Resistencia Adquirida Mutación

Transferencia del DNA

 Resistencia Intrinseca: Característica natural de determinados
grupos de bacterias, siendo especie o género-especifica, que
delimita el espectro de actividad de los antimicrobianos-

Ej: Enterococcus resistente a cefalosporinas

Klebsiella resistente a la ampicilina.

 Puede ser utilizada para confirmar la correcta identificación de una

bacteria, además de servir como marcador en el monitoreo de
procedimientos estandarizados

 Los microorganismos que producen antibióticos son naturalmente

resistentes a los antibióticos que producen
 RESISTENCIA ADQUIRIDA

• Es debida a genes que surgen a partir de mutaciones (cambios

en la secuencia de bases de cromosoma) o por la adquisición
de elementos genéticos transferibles, de forma que aquella
bacteria que presenta estos genes se hacen resistente a la
acción de los antibióticos.

Mutaciones cromosómicas Adquisición de ADN exógeno

 RESISTENCIA ANTIMICROBIANA Y LA
PRESIÓN SELECTIVA
• Las Mutaciones son aleatorias y afectan a
cualquier gen.

• El uso indiscriminado de los antibióticos

selecciona las mutantes resistentes
espontáneas que surgen de la población.

• Posteriormente la población resistente es la

que prevalece en el medio.
 Conjugación: A través de los plásmidos

 Transducción: Por intermedio de un Bacteriofago

 Transformación: Transferencia de genes sin contacto

entre las células

 Transposición: Genes que se transfieren de un plásmido

a otro, para el cromosoma o a un bacteriófago
 Inactivación enzimática de la droga

 Alteración de la Permeabilidad de la Membrana

 Eflujo Activo de Antibióticos (Bombas de eflujo)

 Modificación del sitio receptor de la droga

 Mecanismo muy frecuente relacionado con la producción de
enzimas que neutralizan la droga o su efecto antimicrobiano.

 Las enzimas pueden ser Constitutivas

Inducibles
 Constitutivas: Producidas independientemente de la
presencia del antibiótico que, cuando está presente pasa a
ejercer un efecto selectivo. Ej: Beta-lactamasas

 Inducibles: Determinados antibióticos, cuando entran en

contacto con la bacteria estimulan o desencadenan la
producción enzimática que protegerá a la bacteria de los
efectos del antibiótico. Ej: Aminoglucósidos
 La alteración en la expresión de los canales de
porina modifica la penetración y la consecuente
acción de diferentes antibióticos.

Ej: Pseudomonas resistentes al Imipenem

Disminución en la permeabilidad
 Propiedad de expulsar activamente los antibióticos
de la célula bacteriana, contribuyendo a la
inadecuada concentración del antibiótico y en
consecuencia acción no-efectiva.

Ej: Tetraciclinas
Bombas de eflujo
Los antibióticos se ligan a sitios específicos en la
bacteria. al alterar este sitio el antibiótico no se liga
y de esta manera se torna ineficiente. Esta
alteración es fisico-quimica, disminuye la afinidad
de la droga por el sitio blanco y en consecuencia se
pierde la actividad del antimicrobiano
Mutaciones cromosómicas funcionantes que altera la
acción del antibiótico.

Mutaciones puntuales, adquisición de genes de

dianas modificadas, recombinación genética

Ciertos plásmidos codifican enzimas capaces de

cambiar el blanco, disminuyendo la afinidad a los
antibióticos. Metilasa de ARN – Eritromicina.
RESISTENCIA BACTERIANA
 RESUMEN DE LOS
MECANISMOS DE RESISTENCIA
BACTERIANA
 CLASE DROGA OBJETIVO MECANISMO
Betalactámicos Penicilinas PBP • Enzima inactiva la droga
Cefalosporinas •Alteración de las PBP impide
la unión
Glicopeptidos Vancomicina Precursores de la La modificación de los
Teicoplanina Pared Celular precursores impide la unión
Aminoglicósidos Gentamicina Ribosoma • Enzimas modificadoras
Tobramicina inactivan la droga
Amikacina •Alteración del sitio de unión
Kanamicina en los ribosomas impide la
Netilmicina ligación
•Reducción en la
permeabilidad de la
membrana previene la
entrada de la droga
 Clase Droga Objetivo Mecanismo
Macrolidos Eritromicina Ribosoma •Alteración del sitio de unión en
Azitromicina los ribosomas impide la ligación
•Eflujo genera disminución de la
concentración de la droga en la
célula

Lincosamida Clindamicina Ribosoma •Alteración del sitio de unión en

los ribosomas impide la ligación

Tetraciclinas Ribosoma •Reducción del numero y

tamaño de las porinas impide la
entrada de la droga a la célula
•Eflujo genera disminución de la
concentración de la droga en la
célula
 CLASE DROGA OBJETIVO MECANISMO
Fenicol Cloranfenicol Ribosoma • La cloranfenicol-acetiltransferasa
inactiva la droga
•Reducción en la permeabilidad de
la membrana previene la entrada de
la droga

Quinolonas Ácido nalidixico DNA •Reducción del numero y tamaño de

Ciprofloxacina las porinas impide la entrada de la
Levofloxacina droga a la célula
Norfloxacina •Alteración de la DNA-girasa
Ofloxacina previene que la droga se ligue a la
cinta de replicación del DNA
¿Transferencia por el equipo de salud?
 Control, reducción y uso cíclico de los antimicrobianos.

 Reducir la diseminación de organismos resistentes al promover la

higiene hospitalaria y disminuir la movilización de pacientes.

 Modificación química de los antimicrobianos.

 Desarrollo de inhibidores de las enzimas modificadoras de

antimicrobianos.

 Definir agentes que eliminen a aquellos microorganismos con

plásmidos de resistencia.

 El equipo de salud debe tomar conciencia para disminuir la

diseminación de resistencia.
 SIN TU AYUDA, LOS ANTIBIÓTICOS
PUEDEN PERDER SU EFICACIA
EMISIÓN DE: Inversión de 6,4
mm de Euros
• 3000 anuncios de TV (10 y 25 seg)
• 600 cuñas por radio
• 200 inserciones en prensa
• 7600 soportes de publicidad exterior
• 10.000.000 de impresiones en internet
• 2.000.000 de folletos
• 25.000 carteles
• 100.000 informes para personal de salud

España, Octubre 2006: www.antibioticos.msc.es/

 Se deben considerar dos situaciones que implican a la
bacteria y al antibiótico:

 Una aislado bacteriano identificado puntualmente en una

muestra patológica puede ser sensible, resistente o de
sensibilidad intermedia a un antibiótico dado.

 Frente a un antibiótico una especie o género bacteriano

puede ser: Sensible
Intermedio
Resistente
 El fin esencial del antibiograma es ayudar en la decisión
terapéutica y para:
 Seguimiento epidemiológico
 Comparación de los fenotipos de resistencia de los aislados
responsables de infección a nivel intrahospitalario
 Identificación bacteriana detectando resistencias naturales

La realización de un antibiograma presupone que los

aislados identificados a partir de las muestras analizadas son
responsables del proceso infeccioso
 Cuando el aislado identificado no sea considerado
responsable de la infección que ha suscitado la toma de la
muestra:
 Microorganismo comensal o contaminante
 Cuando el número de UFC/ml es inferior al umbral significativo
 Si la cepa aislada considerada patógena es sensible al tratamiento de
referencia
 En las infecciones cutáneas para las cuales el tratamiento es local o
quirúrgico

La decisión de no realizar antibiograma debe explicarse al clínico, esta

regla puede sufrir algunas excepciones en función de un caso particular
 Incluso si se ha puesto en marcha un tratamiento empírico debe realizarse
el antibiograma cada vez que el microorganismo aislado se considere
patógeno, bien por el significado de especie aislada o bien por su densidad.

 Hemo-cultivos Evidencia de positividad

 Líquido Cefalorraquideo directo de la muestra y verificado
 Muestra de origen respiratorio
 osteoarticulares, catéteres aislado considerado patógeno
coprocultivos, líquidos de punciones
 En caso de que una bacteria comensal se aislé de un paciente
inmuno-comprometido
 En muestras poli microbianas con microorganismos aerobios
y/o anaerobios
 La decisión de tratamiento la toma el clínico siguiendo los
parámetros de la CLSI 2014
 La elección del método por difusión en medio sólido y los
métodos automatizados debe hacerse en función de:

 El número de antibiogramas a realizar

 Las características de los microorganismos a estudiar
 El plazo de la respuesta
 El coste

Estos métodos tienen características comparables con sus

ventajas y desventajas
 Método Inconvenientes Ventajas
• Riesgo de averías •Explotación informática
de los resultados cuya
• Coste de la inversión
fiabilidad depende del
• Ausencia de control visual sistema experto
• Perdida de interés por la bacteriología •Ahorro de tiempo,
manipulación
tradicional
•Mejor expresión de las
•Ausencia de visualización resistencias en medio
(sinergias y antagonismo) liquido
•Estandarización
• Falta de flexibilidad en la elección de
Automatizado •Reproducibilidad de los
los antibióticos resultados
• Dependencia de un solo proveedor •Gestión facilitada de los
stocks de consumibles
• Prestación muy variable (bacterias de
•Facilidad de utilización
crecimiento lento) •Rapidez en la obtención
de los resultados
 Método Inconvenientes Ventajas

•Conservación de los reactivos • flexibilidad, sencillez de

•Falta de reproducibilidad utilización
•Gestión de stocks pesada • “Placer” por
•Manipulaciones fastidiosas bacteriología tradicional
•Lentitud en los resultados •Amplia gama
Manuales
•Bajo rendimiento •Detección de nuevos
•Estandarización mediocre mecanismos
•Mala difusión de ciertos •Independencia frente a
antibióticos proveedores
•Interés didáctico
•Control de pureza
•Coste
Método Medios de cultivo Discos y tiras

• Otros además del Muller Hinton • Mala conservación

•Crecimiento defectuoso
•Mala conservación (desecación)
Manuales •Mala concentración de cationes
divalentes Ca++ y Mg++
•No exentos de Timidina
•Volumen inadecuado
•Medio no horizontal
•Fecha de caducidad
sobrepasada
•Interferencia de las zonas
de inhibición por exceso de
discos
•Inoculación no homogenea
 Método Placas, galerías, tarjetas Inoculo
Automatizados Fecha de caducidad
sobrepasada

• No estandarizar con el
nefelometro
• Cepa no pura
•Colonias tomadas de un medio
selectivo
Todos •Tiempo y temperatura de
incubación
•Atmosfera de incubación (CO2 )
•Errores de lectura y
transcripción
•Bacterias de crecimiento lento
Todos estos errores pueden minimizarse utilizando un control
de calidad con las cepas de referencia:

Cepa ATCC
Escherichia coli 25922
Stapylococcus aureus 25923
Pseudomonas aeruginosa 27853
Enterococcus faecalis 29212
El microbiólogo debe presentar al clínico un documento fácil de leer y
comprender. El antibiograma debe incluirse a continuación del examen
microscópico directo y del cultivo

Menciones obligatoria Menciones facultativas

•Método utilizado
•Lista de los antibióticos por su
denominación internacional
•Respuesta interpretada S,I,R
•CMI del antibiótico utilizado para el
tratamiento de los líquidos de
punción
• Nombre comercial de las drogas
• CMI y Concentraciones criticas
• Fenotipos de resistencia y sus
consecuencias terapéuticas
• Participación del coste del antibiótico en el
coste del tratamiento
•Posología media

•CMI para S. pneumoniae CMI para bacterias aisladas de infecciones

severas
 Pruebas de sensibilidad por dilución
 Pruebas de difusión en placa aerobia o facultativa
 El Etest
 Determinación de la concentración de fármacos en sangre

Estos ensayos pueden indicar que agentes son mas eficaces

contra un patógeno determinado, así como proporcionar una
estimación de la dosis terapéutica
 Pruebas de sensibilidad por dilución: Se utilizan para
determinar los valores de CMI y CML, pueden realizarse en
tubos y en placas
 Pruebas de difusión en placa aerobia o facultativa. La mas
utilizada es el Kirby-Bauer desarrollada en los años 60
 El Etest: Esta prueba es especialmente útil con los
patógenos anaerobios, las CMI se determinan a partir del
punto de intersección entre la zona de inhibición y la escala
de valores de la tira
 Determinación de la concentración de fármacos en
sangre: Esto se logra con ensayos microbiológicos, químicos,
inmunológicos, enzimáticos o cromatográficos. Es necesario
tener presente la unión del antibiótico a las proteínas del
suero, que no puede determinarse mediante ensayos de
antibióticos comunes.